質(zhì)譜鑒定實(shí)驗流程(膠內酶解或溶液內酶解)
1:膠內酶解
2:溶液內酶解
使用儀器
Thermo Scientific Q Exactive (高分辨質(zhì)譜)
技術(shù)優(yōu)勢
適合中度復雜的蛋白質(zhì)樣品, 如相互作用的蛋白質(zhì)條帶和洗脫液; 高準確性, 高靈敏度。
實(shí)驗報告內容
1、相互作用蛋白質(zhì)譜鑒定結果(excel 列表);
2、完整的實(shí)驗步驟、使用儀器、試劑來(lái)源、軟件檢索參數等。
蛋白樣品送樣要求
樣品 | 樣品要求 |
SDS-PAGE條帶 | 考染,條帶清晰可見(jiàn) |
蛋白質(zhì)溶液 | 蛋白質(zhì)總量>5μg,濃度>0.1μg/μl; 說(shuō)明裂解液和洗脫液成分,濃度信息 |
實(shí)驗樣本預處理及運輸注意事項
為保證高質(zhì)量的技術(shù)服務(wù)結果,請您參照以下說(shuō)明對實(shí)驗樣本進(jìn)行處理和保存:
⊙蛋白洗脫液:定量并計算總蛋白量,真空干燥后,密封好管口,冰袋包裝寄送。
⊙蛋白質(zhì)條帶(考染):從凝膠上割取條帶時(shí),避免污染,將條帶放入EP管內,密封好管口,冰袋包裝寄送。
特別提醒:快遞寄送樣本運輸過(guò)程中,可能晃動(dòng)幅度會(huì )比較大,請做好基本運輸防護措施。
注:在寄送樣本時(shí),請填寫(xiě)好樣本登記表,隨樣本一同寄往本公司。
參考文獻:
Jayantha Gunaratne, et al. (2011) Protein Interactions of Phosphatase and Tensin Homologue (PTEN) and Its Cancer-associated G20E Mutant Compared by Using Stable Isotope Labeling by Amino Acids in Cell Culture-based Parallel Affinity Purification. JBC, VOL. 286, NO. 20, pp. 18093–18103
Cezary Waszczak, et al. (2014) Sulfenome mining in Arabidopsis thaliana. PNAS, vol. 111, no. 31, 11545–11550